1.在分子生物学级h2o中制备15 mg/ml（100x）glss。
a.为了获得最佳结果，应立即使用glss，但可能会将其分离分成小份，在-80°c下储存长达1个月。
2.萤光素酶发光中萤光素底物glss的最终浓度
含量测定应为：150μg/ml（荧光素-k为471μm，荧光素na为468μm）。
二、goldbio萤光素酶测定缓冲液（tmca）的制备
在合并到tmca中之前，将所有试剂作为分子级h2o中的储备溶液进行制备。
1.准备一份500mm的mgcl2（100x）溶液。
a.称取476.05 mg（95.21 g/mol）mgcl2并溶解在10 ml h2o中。
b.溶液可储存在rt。
2.制备25mm coa（100x）溶液。
a.称取191.88 mg（767.53 g/mol）coa并溶解在10 ml h2o中。
b.通过过滤器抽取5-10 ml h2o，制备0.2µm过滤器。
c.通过预湿过滤器对100x coa进行灭菌，并在-20°c下储存。
3.制备15mm atp（100x）溶液。
a.称取82.67 mg（551.14 g/mol）atp并溶解在10 ml h2o中。
b.在-20°c下储存。
4.制备400mm tris-hcl，ph 7.8（4x）缓冲液。
a.称取4.85 g（121.14 g/mol）tris碱并溶解在85 ml h2o中。
b.用1m hcl调节ph至ph 7.8，并用h2o将体积调至100 ml。
5.在室温下准备新鲜的2倍tmca原料。
a.计算实验所需的tmca；将所有组件合并为2倍
工作浓度（在h2o中）（随后在荧光素酶测定中降低到1x）。
示例：对于1 ml tmca（2x）：500µl tris-hcl（4x原液）20µl mgcl2（100倍库存）20µl coa（100倍库存）
20µl atp（100倍库存）用h2o将体积调至1 ml。
b.如有必要，您可以在此时加入其他成分（即dtt、edta）。
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