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DAB染色液的使用方法及注意事项

2024/2/24 12:51:38发布11次查看
dab染色液用于免疫组化染色,应用在dako 自动染色系统上。
dab染色液的使用方法
1.dab显色液配制
10mm tris-hcl (ph7.6) 9ml +dab (diaminobezidin 3,3-二氨基联苯胺) +0.3%(w/v) nicl2 或cocl2 1ml ,显色时加入5-10ml 30%h2o2 混匀后立即使用
2. 显色
准备好含有待测蛋白的固相膜:包括电泳、转印、封阻、一抗(或生物素)处理、辣根过氧化酶(hrp)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤。
3.加入适量的dab显色液,铺满整个固相膜表面(可按比例增减)。
4. 置于平式摇荡仪上,在室温下孵育2至5分 钟,避免光照(暗室操作),直至棕褐色沉淀出现。
5.用镊子夹起固相膜,放进无离子水里清洗。
6.空气中晾干。
7. 拍照记录 。
dab染色液的注意事项
1. dab溶液应低温密封保存。如有结晶析出,应确保结晶wan全溶解再行使用;
2. 显色工作液应现用现配,新鲜配制的工作液应为无色或浅棕色,如颜色过深,请勿使用;
3. dab在常温下不稳定,每次取用后均应及时加盖密封放回冰箱,以免因dab分解影响实验,或因渗漏造成实验环境污染;
4. dab有潜在致突变作用,操作时应注意穿戴好防护用具。
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