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线粒体在细胞凋亡检测中的作用

2024/2/17 22:28:44发布27次查看
线粒体在细胞凋亡检测的过程中起着枢纽作用,细胞凋亡刺激因子均可诱导不同的细胞发生凋亡,而线粒体跨膜电位的下降,被认是细胞凋亡级联反应过程中早发生的事件,它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、dna断裂)出现之,旦线粒体dymt崩溃,则细胞凋亡不可逆转线粒体跨膜电位的存在,使一些亲脂性阳离子荧光染料如rhodamine 123、3,3-dihexyloxacarbocyanine iodide[dioc6(3)]、tetrechloro-tetraethylbenzimidazol carbocyanine iodide[jc-1]、tetramethyl rhodamine methyl ester(tmrm)等可结合到线粒体基质,其荧光的增强或减弱说明线粒体内膜电负性的增高或降低。
方法:将正常培养的细胞和诱导凋亡的细胞加入使用终浓度为rhodamine 123(1mm)或终浓度为dioc6(25nm),jc-1(1mm),tmrm(100nm),37°c平衡30min,流式细胞计检测细胞的荧光强度。
注意事项:
1. 细胞凋亡检测始终保持平衡染液中ph值的一致性,因为ph值的变化将影响膜电位。
2. 与染料达到平衡的细胞悬液中如果含有蛋白,他们将与部分染料结合,降低染料的浓度,引起假去极化。
艾滋病病毒igg 小鼠巨噬炎性蛋白1β(mip-1β/ccl4)
氨基末端激酶2igg 小鼠巨噬来源的趋化因子(mdc/ccl22)
氨基末端激酶3igg 小鼠巨噬集落刺激因子(m-csf)
氨肽酶nigg 小鼠解整合素样金属蛋白酶9(adam9)
按蚊igg 小鼠解整合素样金属蛋白酶8(adam8)
白介素10igg 小鼠解脲脲原体(uu-ab)
白介素11igg 小鼠结合珠蛋白/触珠蛋白(hpt/hp)
白介素12igg 小鼠角化内分泌因子(kaf)/双调蛋白(ar)
白介素13igg 小鼠角化内分泌因子(kaf)/双调蛋白(ar)
细胞凋亡检测
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