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荧光免疫分析仪的技术原理

2019/10/10 17:39:25发布67次查看

荧光免疫分析仪的技术原理
荧光免疫检测技术具有专一性强、灵敏度高、实用性好等优点,因此它被用于测量含量很低的生物活性化合物,例如蛋白质(酶、接受体、抗体)、激素(甾族化合物、甲状腺激素、酞激素)、药物及微生物等。
原理
作为免疫分析法的一种,fia同样存在两种模式,即竞争型和夹心型。其中竞争型(以标记抗原的竞争型为例)的测定原理是基于未标记的抗原(ag)和标记抗原(ag-l)竞争结合有限的抗体(ab)而实现的免疫分析法。检测时,ab和ag-l的浓度是固定的。当未标记的ag加到ab和ag-l的免疫混合物中后,ag和ab的结合使得ag-l与ab的免疫复合物的量减少。样品中存在的ag越多,ab结合的ag-l便越少,从ab-ag-l免疫复合物的减少或游离ag-l的增加,可以定量测定出样品中待测抗原的含量。其反应过程如下:ag+ag-l+ab≒(ag:ab)+(ag-l:ab)
对夹心型免疫分析来说,其反应原理是在免疫反应的载体上固定过量的ab,然后加入一定量的ag,免疫反应后,再加入过量的标记抗体(ab-l),以形成“三明治”式夹心免疫复合物。样品中存在的ag越多,结合的ab-l也越多,夹心免疫复合物的标记荧光信号就越强。反应过程如下:ab+ag≒ab:ag≒ab:ag:ab-l。

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