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SMMC-7721-LUC人肝癌细胞-荧光素酶标记培养说明书

2019/8/21 1:41:05发布97次查看
上海琛艺实业有限公司经过数年的努力发展已迅速成为集产品研发、生产、经营为一体的专业化生物工程公司。公司新引进细胞上千株,其中人的已通过str鉴定的有几百株,欢迎各位选购。。。。。。
产品名称:smmc-7721-luc人肝癌细胞-荧光素酶标记说明书
规格:70%密度的25cm2培养瓶的细胞一瓶
特点:细胞代数为4代以内,细胞耐药倍数8倍以上;
包装:内层无菌自封袋;专用防压泡沫盒;外层防压保温气泡袋;说明书
细胞来源:atcc、sciencell、iclc
货期:1-2周
运输方式:快递运输
售后:收到细胞后12天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时通知销售人员,我们将尽快为您解决!
smmc-7721-luc人肝癌细胞-荧光素酶标记说明书三、细胞生长条件: 
细胞系特征
细胞株名称:patu-8988/fu人胰腺癌氟尿嘧啶耐药株种属:智人
组织来源:人胃癌
生长特性:悬浮生长
微生物及支原体检测:阴性
安全性:所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。
培养条件:
完全培养基:90%rpmi-1640+10%胎牛血清+0.1ug/ml fu
gibcofbs-10099-141或hyclonefbs-sh30084.03。
培养条件:37.0c  carbon dioxide(co2),5%
传代方法:
收到细胞后,在倒置镜下(zui好是在4x物镜)观察整个细胞生长情况。
(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,低速离心,打开细胞培养瓶,吸出培养液(注意不要吸出细胞),换 10ml新鲜培养液后继续培养。
(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:
1. 低速离心,弃去培养液,用pbs(不含钙,镁离子)洗1-2次。
2. 按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中(补加完全培养基至8到10ml)。如果没有特别说明,收到细胞后的第一次传代一般是一传二。
注:1、观察细胞zui好在低倍镜(4或5x物镜)下进行,否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10x或20x物镜下。
2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基,细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。
3、有些细胞贴壁不牢,如发现贴壁细胞有脱落,可离心吹打后接种到新瓶内。
4、收到细胞后,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请及时与我们联系。
冻存方法:
  冻存液:90%胎牛血清,10%dmso
 储存:液氮储存
琛艺为您解答细胞培养在实验过程中污染的原因污染是细胞培养的大敌。预防和避免污染是细胞培养成功的关键之一。一开始就要十分重视,防止污染,否则会前功尽弃,不仅浪费时间,而且浪费人力、物力,甚至造成无法弥补的损失。 细胞培养中常见的生物污染类型有 7 种,分别是细菌污染、支原体污染、原虫污染、黑胶虫污染、真菌污染、病毒污染以及非细胞污染。他们在细胞培养中污染的特点如下: 
1. 细菌:细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显。   
2. 支原体:黑色的,好象多为多形,培养液一般培养液一般会浑浊,原体感染,国内血清很多都没有做支原体阴性检测,而支原体是牛血清中常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后,细胞病变不很明显,只是慢慢死qu。
3. 黑胶虫:可以穿透滤膜,也可以通过空气传播,低倍下为黑色点状,高倍下可看见黑色的小虫游来游去,培养液也是不浑的,一般不会太影响,细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好,且观测到的运动物无明显增多,且培养液颜色、透明度无明显变化,可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响,在细胞增殖旺盛之后会自然消失,除更换血清外无须特殊处理。
4. 真菌:一般培养液清亮,不变色,镜下有丝状物,有些真菌开始很像死细胞碎片,只是它很多很多的小块很清楚,象珊瑚状,不象细胞碎片分不清,慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢,不象细菌那么容易被发现,但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了,也很难救活了。
5. 原虫:培养液可轻微浑浊,显微镜下那些细小的点状物数量非常多,轻微活动,细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢,而且细胞状态不好,边缘不清楚,细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的,但他们的数量小,细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长,只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长,终形成恶性循环。
6. 病毒:组织细胞培养过程中,如果没有除去潜在的病毒,就会产生病毒污染。目前,从原代猴肾细胞的培养中已发现不少于20种血清性病毒。 尽管病毒污染的细胞不影响原代培养,但生产疫苗是不安全的。因此,潜在病毒是细胞大量生产和疫苗、干扰素等生物制品制作中的难题。
7. 非同种细胞污染 :即是细胞交叉污染,由于细胞培养操作时各细胞株所需的器材和溶液没有严格分开,往往会使一种细胞被另一种细胞污染。目前,世界上已有几十种细胞都被hela细胞所污染,致使许多实验宣告无效。非细胞培养物所造成的化学成分的污染也偶有发生,大多是由于细胞培养所需物品清洗消毒不彻底而带入一些有毒化学物质所致。 

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