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TRITC标记多糖(葡聚糖、聚蔗糖、透明质酸)

2019/7/11 6:04:56发布317次查看
 tritc标记多糖一:tritc葡聚糖
化学名:
四甲基罗丹明异硫氰酸酯-葡聚糖
葡聚糖(3´,6´双(四甲基氨基)-3-氧代螺(异苯并呋喃-1(3h),9´-[9h]占吨]-5(或6)-基)氨基硫代甲酸酯]
四甲基罗丹明b硫代氨基甲酰基 - 葡聚糖
结构:
特性:通过与四甲基罗丹明b异硫氰酸酯(混合异构体)偶联,利用特选葡聚糖组分制备得到了tritc-葡聚糖。 ds(tritc)的范围从0.001到0.008。 在这一低取代度范围下,罗丹明部分叔氨基的电荷贡献可以忽略不计。审查了所有批次的分子量、干燥失重和游离tritc。
光谱数据:
激发在550nm下进行,而荧光测量在572nm处进行(见图12)。我们实验室的研究表明:tritc-葡聚糖溶液的荧光在ph 3-9的范围内只有轻微的变化(见图13)。这在进行定量测量时很有意义。在生物介质中进行测量可能会显著影响荧光强度,其有可能会增强,也有可能会减弱。
图12. 在0.025m硼酸盐ph9.0(10mg 盐溶于50ml缓冲液中)中,tritc-葡聚糖的荧光扫描光谱。激发波长:550nm;发射波长:572 nm。
图13 tritc-葡聚糖的荧光强度(em.572nm)与ph的关系。
储存和稳定性:tritc-葡聚糖的稳定性尚未有任何详细研究,但据推测其与fitc-葡聚糖应较为相似,因为两种物质的取代基均通过硫代氨基甲酰基单元进行连接。只有在高ph(> 9)和高温下,硫代氨基甲酰基键才存在水解的风险(参见fitc-葡聚糖)。 tritc-葡聚糖溶液(ph 6-7)可以在室温、黑暗中储存数周。储存在密封容器、黑暗中的干燥粉末保质期为5年。
tritc-葡聚糖的应用:tritc-葡聚糖主要用于细胞、血管和组织中的渗透性和运输研究。荧光的测量可以通过活体荧光显微镜定量和实时进行。该技术具有高灵敏度,可以检测到组织液中浓度低至1μg/ ml的物质。另一个重要的特性是tritc-葡聚糖不会结合在动脉壁上54,55。
人们已证明仓鼠颊囊的微血管是由各种炎症条件所引起的血浆渗漏的有用研究模型。使用合适的过滤器(490 / 520nm),可以通过活体荧光显微镜检查脸颊囊,并用数码相机拍摄图像(参见图14)。静脉内给予5%tritc-葡聚糖150生理盐水溶液(约100mg / kg体重)56-58。。有关该技术的更多信息,请参阅thorball3。 tritc-葡聚糖已被广泛应用于组织和细胞的渗透性研究,我们只随机选择了少部分参考文献供您使用59-65。
图14. 在组胺攻击15分钟后,将tritc-葡聚糖150注射到仓鼠脸颊处。 (已获得e.svensjö许可)
供应商:西安凯新生物科技有限公司
请点击此处西安凯新生物科技有限公司进入展台查看
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产品十:tritc-聚蔗糖(tritc-ficoll®)化学名:
四甲基罗丹明异硫氰酸酯 - 聚蔗糖
聚蔗糖(3´,6´双(四甲基氨基)-3-氧代螺(异苯并呋喃-1(3h),9´-[9h]占吨]-5(或6)-基)氨基硫代甲酸酯
四甲基-罗丹明b硫代氨基甲酰基-聚蔗糖
结构:
特性:tritc-聚蔗糖是一种聚蔗糖衍生物,其是通过蔗糖与表氯醇交联合成的聚合物。 tritc-聚蔗糖通过聚蔗糖与tritc反应制备而成,反应条件与tritc-葡聚糖的条件相似。 tritc-聚蔗糖可以在很宽的ph范围内易溶于水和盐溶液。 聚蔗糖比葡聚糖对酸更敏感,因此在酸性ph范围下工作时还请务必小心。其以易溶于水的红色粉末形式供应。
光谱数据:
图15. 在0.025m硼酸盐ph9.0(11mg 盐溶于50ml缓冲液中)中,tritc-聚蔗糖70的荧光扫描光谱。激发波长:522nm;发射波长:552 nm。
储存和稳定性:在室温、气密容器中,tritc-聚蔗糖粉至少可以稳定储存6年。关于tritc-聚蔗糖在溶液中的稳定性尚未有任何详细研究报道。然而,四甲基若丹明部分和聚蔗糖之间的硫代氨基甲酰基连接基团的稳定性类似于葡聚糖上连接基团(参见tritc-葡聚糖)的稳定性。但由于蔗糖中糖苷键的不稳定性,所以不建议将聚蔗糖基产品储存在低ph环境下。聚蔗糖本身可以在中性和弱碱性ph下高压灭菌。
tritc-聚蔗糖的应用:tritc-聚蔗糖与fitc-聚蔗糖的应用基本相似,但其还具有某些优点。如前所述,与fitc标记物相比,四甲基若丹明的荧光对ph的依赖性较小。另外,更长的发射波长还能避免实验环境中的背景干扰。
tritc-聚蔗糖 70已用于肾内皮屏障研究66,67。tritc-ficolls也已用于了胸腺非依赖性抗原的抗体应答研究68。
三:四甲基罗丹明透明质酸(tr-ha)化学名:
四甲基罗丹明透明质酸
透明质素,6´双(四甲基氨基)-3-氧代螺(异苯并呋喃-1(3h),9´-[9h]占吨]-5(或6)-基)
四甲基罗丹明b透明质酸
结构:
特性:自马链球菌中提取的透明质酸是一种由β(1-3)葡糖苷酸和β(1-4)氨基葡萄糖苷单元交替组成的多糖,对其用氨基-四甲基罗丹明进行标记,得到可溶于水和电解质的红色产品。 ds在0.001到0.008之间。 用gpc系统测定的分子量(用葡聚糖标准样校准)mw为6.0×106。
光谱数据:
图16. 在0.025m硼酸盐ph9.0(12mg 盐溶于50ml缓冲液中)中,tr-ha的荧光扫描光谱。激发波长:552nm;发射波长:576 nm。
四甲基罗丹明透明质酸应用:四甲基罗丹明透明质酸(tr-ha)与荧光素透明质酸(见前面部分)的应用基本相似,但其还具有某些优点。如前所述,与fitc标记物相比,四甲基若丹明的荧光对ph的依赖性较小。另外,更长的发射波长还能避免实验环境中的背景干扰。tr-ha和双光子成像已用于脑组织的侵入性生长研究中69。
供应商:西安凯新生物科技有限公司
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