产品名称:beyogold™ 50毫升锥形离心管供应商
规格:25个/包,20包/箱
储存条件:—20℃,12个月
用途:又称培养细胞消化液,用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化。
注意事项:无菌溶液,经过滤除菌处理。主要由胰酶或胰蛋白酶、edta组成,含酚红。自备材料:
1、 pbs、hanks液或无血清培养液
2、 显微镜
3、 离心机
操作步骤(仅供参考):
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 pbs、hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 trypsin-edta solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 trypsin-edta solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
注意事项:
1、 尽量减少反复冻融的次数,以免失效。
2、在使用 trypsin-edta solution 过程中,要特别注意避免消化液被细菌污染。
3、trypsin-edta solution 消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。使用说明:
1. 贴壁细胞的消化:
a.吸去培养液,用无菌的pbs、hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
b.加入少量胰酶细胞消化液(含酚红,不含edta),略盖过细胞,室温放置30秒至2分钟。不同的细胞消化时间有所不同。
c.显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除胰酶细胞消化液(含酚红,不含edta)。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
d.如果发现消化不足,则加入胰酶细胞消化液(含酚红,不含edta)重新消化。 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液(含酚红,不含edta)后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2. 组织的消化:
a.不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。 附录:不同胰酶细胞消化液的比较和选择
1. 如果希望消化能力比较强,推荐选择c0201胰酶细胞消化液(0.25%胰酶)和c0203 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶,含酚红),这两种胰酶细胞消化液都含有edta,消化能力相对更强一些。
2. 如果希望观察比较方便,推荐选择含酚红的c0203 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶,含酚红)和c0207 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶,含酚红,不含edta)。
3. 对于酚红可能会干扰后续的测试分析,推荐选择不含酚红的c0201 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶)和c0205 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶,不含edta)。
4. 对于edta可能会干扰后续的测试分析时,推荐选择不含edta的c0205 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶,不含edta)和c0207 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶,含酚红,不含edta)。
5. 对于胰酶特别敏感的细胞,即对于消化时间特别快、消化时间比较难控制的情况,推荐选择c0202胰酶细胞消化液(0.05%胰酶)或c0204 胰酶细胞消化液(0.05%胰酶, 含酚红)。
dnase i, rnase-free (supplied with mncl2) 1000 units
rnase a, dnase and protease-free 10 mg
rnase t1 100000 units
rnase t1 500000 units
rnase a/t1 mix 1 ml
lambda exonuclease 1000 units
lambda exonuclease 5000 units
exonuclease i 4000 units
exonuclease i 20000 units
endonuclease iv, e.coli 100 units
rnase i 1000 units
rnase i 5000 units
ribolock rnase inhibitor 2500 units
ribolock rnase inhibitor 4x2500 units
ribolock rnase inhibitor 24x2500 units
agarase 100 units
dna polymerase i 500 units
dna polymerase i 2500 units
klenow fragment 300 units
klenow fragment 1500 units
klenow fragment, lc 300 units
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