支原体号称细胞培养中的大敌。它就像man性du药,杀细胞于无形中。据统计,超过25%的细胞系中感染了支原体,而研究者大多并不知晓。常规检测可以降低支原体意外污染的机会,但并不能完全避免。
在细胞培养中,我们通常使用0.2微米的滤膜来去除污染物。然而,这道防线只能阻挡细菌,而无法阻挡支原体。因支原体更小(约为0.15-2 µm),而且形状灵活,故总是能逃过我们传统的滤膜。这时,我们有必要升级秘密技巧,与支原体斗争到底。
如何升级呢?选用孔径更小的滤膜,这也许是个不错的主意。目前市场上有多家公司提供0.1微米的滤膜,如赛默飞世尔。thermo scientific nalgene 0.1微米滤器具有独特的nalgene rapid-flow™ 膜支持系统,有四种容量可供选择:150ml、250 ml、500 ml 以及1000 ml。rapid-flow™ 系统采用多排柱状结构,使得膜系统相较于其他过滤生产商使用的辐射辐条设计更加均一稳定。据称,这种设计特点能使滤膜通过更大的流速和通量。是不是这样呢?赛默飞世尔的研究人员将nalgene 0.1微米滤器与市场上的类似产品进行了性能比较。
谁来参加这场比赛?除了nalgene rapid-flow™ 1000ml 滤器、rapid-flow™ 500ml 滤器,还有两个强劲的对手,它们分别是m品牌的1000ml 滤器、和c品牌的500ml 滤器。当然,这些都是0.1微米pes滤膜。测试的液体是经典的细胞生长培养基:dmem+10% fbs(胎牛血清)及rpmi 1640+10% bgs(成牛血清)。
比什么?流速和堵塞体积。研究人员记录dmem+10% fbs 和rpmi 1640+10% bgs 每滤出100ml 的时间点,直至滤器堵塞(即每秒滤出一滴液体或过滤100ml 液体超过2 分钟)或者1l dmem+10% fbs、rpmi 1640+10% bgs液体过滤完毕。