不同点仅仅是现代液相色谱比经典液相色谱有较高的效率和实现了自动化操作。高效液相色谱的原理与经典液相色谱相同,但是它采用了高效色谱柱,高压输液泵和高灵敏度检测器。因此，高效液相色谱的分离效率,分析速度和灵敏度大大提高。定量准确,达到可与gc相媲美的分离分析性能。特别是结合计算机技术,hplc已成为高度自动化和智能化的现代分析仪器。经典的液相色谱法,流动相在常压下输送,所用的固定相柱效低,分析周期长例如柱长170㎝,柱内径0.9㎝,流动相速度30㎝3/h,约需20多小时才能分离出20种氨氨ji酸;而用高效液相色谱法,只需1小时之内就完成。
现代液相色谱法引用了气相色谱的理论,流动相改为高压输送,色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料(几微米至几十微米)填充而成,均匀规则的固定相、传质阻力小、分离效率高。柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或100几十万)，同时柱后连有高灵敏度的检测器,使分析灵敏度比经典色谱有较大提高。例如用紫外检测器最小检测限可达到10-9g，而荧光检测器则可达到10-11g。虽然气相色谱法是一种很好的分离、分析方法，它具有分析速度快,分离效能好和灵敏度高等优点。
但是气相色谱仅能分析在操作温度下能汽化而不分解的物质。据估计,在已知化合物中能直接进行气相色谱分析的化合物约占15%,加上制成衍生物的化合物,也不过20%左右。由于大量有机物,离子型化合物易受热分解或失活物质不能用gc分析,因此需要发展hplc。对于高沸点化合物;难挥发及热不稳定的化合物,离子型化合物及高聚物等,很难用气相色谱法分析。为解决这个问题,70年代初发展了高效液相色谱。

---

广州劢博仪器有限公司
020 37412709