① 在无抗生素的培养基中消化、计数和稀释细胞,稀释到常规细胞传代的浓度。
② 分散细胞悬液到多孔培养板中,或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内,把选择抗生素加入到每一个孔中。
③ 每天观测细胞毒性指标,如脱落,出现空泡,汇合度下降和变圆。
④ 确定抗生素毒性水平后,使用低于毒性浓度2-3倍浓度的抗生素的培养液培养细胞2-3代。
⑤ 在无抗生素的培养基中培养细胞一代。
⑥ 重复步骤4。
⑦ 在无抗生素的培养基中培养4-6代,确定污染是否以已被消除。
在进行新的细胞培养时,必须先消除组织培养的污染, 这样才不会影响实验的效果。
