asfv通过受污染的液体和饲料经口腔
感染猪只的概率到底有多少？
导读
近期，美国堪萨斯州立大学的一项关于asfv通过液体和饲料传播的研究成果发表于期刊emerging infectious diseases，该项研究评估了asfv毒株 （georgia 2007/1）在猪只的常规饮水和进食过程中，通过口腔造成感染的最低感染剂量和半数感染剂量。
该研究表明，asfv georgia 2007/1毒株很容易通过口腔途径造成猪只的感染。病毒通过液体和饲料经口腔感染的最低感染剂量分别为100tcid50和104tcid50；半数感染剂量分别为101.0tcid50和106.8tcid50。
实验方法
将一定量的asfv（georgia 2007/1）加入到终体积为100 ml rpmi培养液或100 g植物性全价饲料中，分别作为液体组和饲料组的asfv接种物。
液体组和饲料组均做7次重复实验，每次实验所用接种物中的asfv剂量如table 1所示（后一次重复实验所用剂量根据前一次实验结果调整）。每次重复实验中，液体组和饲料组均使用6只猪（平均日龄为51.8±2.2），其中5只猪喂饲含有一定量的asfv的培养液或全价饲料，另1只猪作为阴性对照，喂饲相同体积的无病毒培养液或全价饲料。在接种asfv前，先让猪只适应饮水器，喂食器和喂饲习惯。
table 1. 重复实验中，液体组和饲料组接种物中asfv剂量
+：1只猪在dpi 5前死于非asfv感染，在结果分析中被剔除。
在dpi 0 - dpi 5期间，每天采集血液样本。在dpi 5时，进行安乐死并采集血液和组织样本（dpi 5前就表现出临床症状的猪只将被安乐死，同样采集血液和组织样本）。最后对样本进行血清pcr、脾脏pcr和脾脏病毒分离检测。当≥1个检测结果为阳性时，判断为asfv感染。
另外，在单次暴露的基础上，研究还利用统计学方法模拟了重复暴露的情况下，asfv通过液体和全价饲料的感染几率。
实验结果
1、无论是液体组还是饲料组，感染的几率都随着剂量的增加而增高，液体组和饲料组的最低感染剂量分别为100tcid50和104tcid50。对于单次暴露， 在107.5tcid50剂量下，液体组与饲料组相比具有更高的感染几率（figure 1 a）。
2、在模拟多次暴露时，液体组和饲料组在所有剂量水平上的感染几率均升高。当液体组的暴露次数达到10次时，最低感染剂量（1 tcid50）的感染几率接近1。饲料组多次暴露时，低剂量感染几率的95% ci的宽度增加，表明反复暴露时，感染几率的不确定性增加（figure 1 b，c）。
figure 1. 不同剂量下，asfv经液体（蓝色线）和全价饲料
（黑色线）通过口腔造成感染的几率
a：单次暴露；b：3次暴露；c：10次暴露。阴影表示95% cls。
3、能够引起50%猪只感染的剂量分布如图所示（figure 2），液体组和饲料组的半数感染量（id50）分别为101.0(95% ci 100–102.3)和106.8(95% ci 104.6–108+)。
figure 2 . asfv 半数感染量（id50）分布
液体组为 101.0，饲料组为106.8（绿线表示）。
总结与讨论
对于上述结果，研究者认为液体中的病毒经口腔途径传染效率更高，可能是因为液体为病毒提供了一个很好的介质，使其能够更好的与扁桃体接触。而饲料的摄入能够刺激唾液蛋白酶的分泌，从而影响病毒的完整性。此外，饲料中的基质可能会阻碍病毒与扁桃体的接触，降低病毒在进入胃肠道前与淋巴组织和上皮组织接触的几率。
尽管如此，研究者认为对于现代化猪场来说，污染的饲料可能比水具有更大的传播风险。一方面因为饲料生产高度集中且运输频繁，一旦被污染便能够很快的分布到许多猪场中；另一方面，实际中猪只采食饲料的量和频率要远远多于本次研究所用的采食量（100 g）和频率（1次）。
已有多起asfv疫情被认为与受污染的食物和饮水有关，如2007年，asfv在高加索地区爆发被认为与受污染的猪肉制品有关；2014年，拉脱维亚疫情被认为与受污染的鲜草和农作物有关；最近，asfv入侵到罗马尼亚一家大规模、生物安全性极高的猪场，而引起此次疫情的asfv被认为来自于被污染的多瑙河河水。抛除受污染的猪源性饲料成分，植物性饲料也被认为有传播asfv的潜在风险，但asfv通过植物性饲料或液体经口腔感染猪只的风险究竟有多大？美国堪萨斯州立大学的这项研究或许能给我们提供些参考。
同时笔者认为，此项研究给我们中国养猪业在防控asf方面带来以下3点启示：
（1）中国饲料品牌繁多，养殖场必须保证入场的每一批饲料的asfv检测都是合格的；
（2）在高养殖密度地区和asf疫区，需时刻监测养殖场的饮水和地下水是否受到asfv污染。同时，对于启动复养的企业，必须保证复养前饮用水的asfv检测合格；
（3）某些植物性饲料原料（如豆粕，玉米等）可能为asfv的传播提供良好的媒介，因此饲料厂必须保证所用饲料原料来源于合格的供应商或者在引入前要进行asfv检测。
来源：爱德士检测诊断
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