概述：
 dna聚合酶i (klenow)大片段是大肠杆菌dna聚合酶i的蛋白水解物，该酶具有dna聚合酶活性和3′→5′核酸外切酶活性，但失去了5′→3′核酸外切酶活性，该酶不会降解5′末端dna，同时保留了高保真的聚合酶活性(1)。
 来源：
 来源于重组e.coli菌株，该菌株含有dna聚合酶i大片段 (klenow) 基因的表达载体。
 应用(2)：
 1. 双脱氧法dna序列测定(sanger法)。
2. 5′突出末端的补平，形成平末端。
3. 3′突出末端的切除，形成平末端。
4. 合成cdna第二条链。
5. 随机引物的标记。
6. 诱变反应中第二条链的合成。
 反应条件：
 1× klenow反应体系含:1×klenow反应缓冲液[25 mm tric-hcl (ph 7.4 @ 25°c)，0.1 mm edta，1 mmdithiothreitol (dtt)，50%甘油 (v/v)]，添加dntps (不随酶附赠)，37°c温育。
 质量检测:
 核酸内切酶活性：50 μl反应体系中，50 u本酶与1μg的puc19质粒于37°c温育4小时，电泳条带无明显变化。
纯度：经sds-page (考马斯亮蓝染色) 检测其纯度大于95%。 
 质保声明：
 dna聚合酶i (klenow)大片段经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。
 单位定义：
 1单位指在37°c条件下，反应30分钟能使10nmol的dntps掺入酸不溶性沉淀物所需的酶量。
 参考文献:
 1. jacobsen, h. etal. (1974). the n-terminal amino-acid sequences of dnapolymerase i from escherichia coli and of the large and the smallfragments obtained by a limited proteolysis. eur. j.biochem. 45:623-627.
2. sambrook, j. et al. (2001). molecularcloning: a laboratory manual, (3rd ed.), cold springharbor laboratory press.

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