临床意义 口蹄疫(foot-and-mouth disease,fmd)又称口疮热,是由口蹄疫病毒引起的主要侵害偶蹄动物的急性、热性、高度接触性传染病。检测特异性口蹄疫抗体可作为该病疫苗免疫状况及辅助诊断指标。 本试剂盒采用口蹄疫(o型)抗原作固相抗原检测猪血清中的特异性口蹄疫(o型)抗体。本试剂灵敏度高,特异性强,重复性好,操作方便快速,可分多次使用。 试剂组成
1.预包被板48t/96t; 6.样本稀释液(5号液)1支;
2.酶结合物(1号液)1支; 7. 终止液(6号液)1支;
3.洗涤液(2号液)1支; 8. 阳性对照品1支;
4.底物(3号液)1支; 9. 阴性对照品1支;
5.显色剂(4号液)1支; 10.使用说明书1份;
操作程序洗涤液配制 用蒸馏水或去离子水将浓缩洗涤液(2号液)按1:10稀释,如取30ml浓缩液与270ml蒸馏水或去离子水充分混匀即为工作洗涤液。 样本稀释:用样本稀释液(5号液)将待检血清按1:100稀释,如5ul血清+500ul样本稀释液,充分混匀。阴、阳对照不用稀释,直接加样。 加样反应:样本检测孔每孔分别加已稀释样本血清100ul。同时设阴性、阳性及空白对照各一孔,取阴性、阳性对照各100ul分别加入反应孔内,空白对照孔仅加入100ul样本稀释液(5号液)。37℃避光反应30分钟后甩去孔内液体,每孔注满工作洗涤液洗涤3次,每次均需停留1分钟后再甩净拍干。 加酶反应:除空白对照孔外其余每孔加酶结合物(1号液)1滴,37℃避光反应30分钟后甩去孔内液体,如上洗涤,拍干。 显色反应:加底物(3号液)和显色剂(4号液)各一滴,混匀,37℃下避光显色10分钟。加终止液(6号液)一滴,混匀,终止反应(加终止液后蓝色会变为黄色)。 结果判断 仪器判断:以空白对照调零用酶标仪于450nm(620nm作参比波长)读取o.d值,待检孔o.d值大于阴性对照2.1倍者为阳性。当阴性对照o.d值低于0.08时按0.08计算。 注意事项 试剂盒在2-8℃下保存,每次取出时先平衡至室温后使用。滴瓶每次用后一定要将盖拧紧,各瓶盖之间切不可混用。各试剂盒之间不可混用。 洗涤时将蒸馏水加满孔内,每次停放三十秒钟后甩去孔内液体。禁用自来水等其它水源。 为提高试验的可比性建议使用仪器判读结果,并对阴性对照测复孔以减少误差。

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李海龙
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