大鼠激活素a(acv-a)elisa试剂盒
上海仁捷生物科技有限公司
英文名称：ratacv-aelisakit
实验类型：夹心法
检测范围：1.25ng/ml40ng/ml
最低检测限：0.1ng/ml
应用范围：血清、血浆、组织匀浆、细胞培养物上清或其它相关液体（本产品仅供实验室科研及非临床用途）
大鼠激活素a(acv-a)elisa试剂盒实验目的
本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中大鼠激活素a（acv-a）的含量。
有效期：6个月
保存条件：2-8℃
实验原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（elisa）。往预先包被大鼠激活素a（acv-a）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、hrp标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物tmb显色，tmb在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠激活素a（acv-a）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（od值），计算样品浓度。
大鼠激活素a(acv-a)elisa试剂盒组成试剂盒组成96孔配置48孔配置备注微孔酶标板8孔×12条8孔×6条无标准品0.3ml×6管0.3ml×6管无样本稀释液6ml3ml无检测抗体-hrp10ml5ml无20×洗涤缓冲液25ml15ml按说明书进行稀释底物a6ml3ml无底物b6ml3ml无终止液6ml3ml无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无
操作步骤
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μl；
3.样本孔中加入待测样本50μl；空白孔不加。
4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（hrp）标记的检测抗体100μl，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μl），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6.每孔加入底物a、b各50μl，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μl，15min内，在450nm波长处测定各孔的od值。
洗板方法
手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将30（48t的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48t的20倍）倍稀释后备用。根据需要，重复此过程数次。
自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中