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ELISA实验的使用目的概述

2019/2/28 16:52:41发布66次查看

酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay 简称elisa)是在免疫酶技术(immunoenzymatic techniques)的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术,elisa过程包括抗原(抗体)吸附在固相载体上称为包被,加待测抗体(抗原), 再加相应酶标记抗体(抗原),生成抗原(抗体)--待测抗体(抗原)--酶标记抗体的复合物,再与该酶的底物反应生成有色产物。借助分光光度计的光吸收计算抗体(抗原)的量。待测抗体(抗原)的定量与有色产生成正比。
根据通蔚试剂(上海)多年的研究经验指出elisa可以用来检测血清样本,看有还是没有某个抗原或抗体,也可以看该抗原或抗体是多还是少,可以比较不同血清样本之间该抗原/抗体的含量高低。
如果该抗原是一个病原,或该抗体是一个对某病原具有特异性的抗体,则elisa检测该抗原或该抗体的结果,可以用来帮助判断,提供血清的个体,是否感染或曾经感染过这个病原。 
elisa测定模式包括以下几种:双抗体夹心法、间接法、双抗原夹心法、igm抗体捕捉法、竞争抑制法,其中竞争抑制法(hbeab,hbcab等采用)因受操作时差所引起的不公平竞争等因素的影响,结果重复性较差,质量较难控制。
不同批次的elisa试剂在制作过程中很难保证质量完全一致,即使是通过批批检的项目其检测结果也存在差异,因此必须选择和订购长批号的试剂,并保证保存条件。严格执行这一标准可以避免因试剂批号改变而重新建立质控体系及重新评估试剂的复杂过程,并且能够保证结果的稳定性;对于效期短、使用率低的试剂,应当小量分装,每次使用则取分装部分即可,避免反复冻融造成试剂的失效。
标本干扰因素包括内源性干扰因素和外源性干扰因素,前者包括类风湿因子、补体、异嗜性抗体、自身抗体、溶菌酶等,后者包括标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存时间过长、标本凝固不全、冷冻标本的反复冻融等。
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