mcf-7-taxol细胞,人乳腺癌紫杉醇耐药性细胞从冰箱里取出细胞冷冻管,立即放入37℃震动水浴槽中快速解冻。待冻存管中细胞混合液完全融化后,立即加入1ml细胞培养基于该冷冻管中与细胞混合,再将细胞混合液从冷冻管中移入含有9ml该细胞培养基的试管中,混合均匀。
操作步骤:
mcf-7-taxol细胞,人乳腺癌紫杉醇耐药性细胞,在倒置镜下(是在4x物镜)观察整个细胞生长情况。
(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换8-10ml新鲜培养液后继续培养。
(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用pbs(不含钙,镁离子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%trypsin-0.53mm edta)于培养瓶中,倒放于37℃培养箱1-3分钟预热,之后翻转培养瓶10-30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。如果没有特别说明,收到细胞后的次传代一般是一传二。
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