- 药准字:
- 主要组成成分:
- 性状:
- 适应症:
- 规格:
- 贮藏:
- 有效期:12
- 生产企业:
产品简介:
针对内源性基因或报告基因设计的sirna,作为rnai实验阳性对照,用于确认rnai实验可行性。常规化学合成sirna为21-25nt的双链小分子rna ,即用型。
产品描述:
锐博生物提供以内源基因(如gapdh,actb,p65等基因)为靶基因的阳性对照sirna,这些sirna经过特异性设计及实验验证,用于确认rnai实验流程可行性,保证了rnai实验的顺利完成。
运输条件:
产品以冻平粉的形式,需温运输。收到产品后,请于-20 \'c--80\'c保存东平粉可以稳定保存一年。使用前瞬时离心,用rnase-free h,o或灭菌ddh,o自己制成20um储存液,分装保存,避免反复冻融(不超过5次)。
细胞实验方法:
为了降低细胞密度、试剂用量,转染效率等因素导致的孔间差异,保证实验的可靠性和可重复性,一般建议.
1)转染实验中每个转染样局至少设置3个复孔,
2)接种细胞时,每孔接种的细胞数量尽量保持一致,且细胞均匀分布。
1.转染。浓度:
sirna产晶最佳工作浓度因不同的细胞类型及研究目的而异。锐博生物推荐的sirna开始转染浓度为50nm ,转染后检测时间为24-72h。最佳转染效率一般通过设置时间曲线和浓度梯度进行优化,优化的范围建议为5-100nm 。
2.转染步骤
以ribofecttm cp reagent 转染sirna于24孔板, 转染浓度为50nm为例.
1)接种细胞
a贴壁细胞转染前一天,接种1 x10\'细胞至含奇500μl完全培养基的24孔板培养孔中,使转染时的细胞密度能够达到50-80% 。
注1)不固细胞生长速度不同1接种细胞的数量需要依据经验而定2 )每孔接神的细胞数量尽量倡圃,使细胞均匀分布于培养基表面。
b悬浮细胞.
接种1 x10\'-5 x 10\'个细胞至含萄500 111完全培养基的24孔板。
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