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DNA聚合酶Ⅰ(E.coli)

2018/11/14 9:42:30发布82次查看
  • 品牌:robustnique
  • 外观性状:
  • 酶系活力:
  • 温度适用范围:
  • 产品标准:
  • 保质期:其他

概述:
 dna聚合酶i是依赖于dna的dna聚合酶,具有3´→5´和5´→3´核酸外切酶活性(1)。该酶的5´→3´外切酶活性能够切除位于延伸链前端的核苷酸,从而使切刻平移成为可能。
 来源:
 重组e.coli菌株,携带有高表达的pola基因。
 应用:
 1. dna的切刻平移,制备具有高比活性的探针(2)。
2.cdna的第二条链的合成(3,4)。
 反应条件:
 1× dna聚合酶i反应体系含:1×dna聚合酶i反应缓冲液[10 mm tris-hcl (ph 7.9 @25°c),50mm nacl,10mm mgcl2,1mm dtt],加入dntps (不随酶提供),37°c温育。
 质量检测:
 核酸内切酶活性:50µl反应体系中,25u本酶与1µg的puc19质粒于37°c温育4小时,<10%的puc19质粒由超螺旋变为缺刻状态。 
 质保声明:
 dna聚合酶i经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。
 单位定义:
 1单位指37°c条件下,30分钟内能催化10nmol的dntps掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。
 热失活:
 65°c温育10分钟即可失活。
 参考文献:
 1. lehman, i.r. (1981). in p.d.boyer (ed.), the enzymesvol. 14a, (p.16-38). san diego: academic press.
2. meinkoth, j. and wahl, g.m. (1987). methodsenzymology,152, 91-94.
3. gubler, u. and hoffmann, b.j. (1983). gene, 25, 263-269.
4. d‘ alessio, j.m. and gerard, g.f. (1988). nucleic acidsres., 16,1999-2014.

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