活体成像技术（opticalinvivoimaging）目前主要采用生物发光（bioluminescence）与荧光（fluorescence）两种技术，生物发光法是基于荧光素酶能催化底物（d-luciferin或coelenterazine）化学发光的原理，将体外能稳定表达荧光素酶的细胞株植入动物体内，与后期注射入体内的底物发生反应利用光学系统检测光强度，间接反映出细胞数量的变化或细胞的定位。这项技术已被广泛应用于多个领域，最常用的有肿瘤或疾病动物模型的建立，并可用于病毒学研究、sirna研究、干细胞研究、蛋白质相互作用研究等。
原理：常见的荧光素酶有两种，分别是萤火虫荧光素酶（fireflyluciferase，编码基因是luc）和海肾荧光素酶（renillaluciferase，编码基因是rluc），前者的底物是d-luciferin，后者的底物是coelenterazine。它们共同的作用原理是在atp和荧光素酶的催化作用下，底物被氧化发光（不同底物光的颜色和波长不同），当底物过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性。
应用：
1）体外化学发光分析（in vitro）；
2）活体成像实验（in vivo）；
3）高灵敏度atp分析；
4）活细胞、组织或生物体内luc标记基因和荧光素酶-融合基因体内/体外表达的成像分析；
5）广泛用于报告基因分析，免疫分析和atp荧光卫生监测分析；

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颜勇
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