igm类单克隆抗体纯化试剂盒使用说明书（bf06005）
bf06005x    可纯化25ml腹水
bf06005     可纯化50ml腹水   
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您好！感谢您选择了我们的产品，请您在读完此说明书后再开始您的实验，这对您顺利完成实验很有帮助。
试剂原理：本试剂盒利用不同类别免疫球蛋白结构特性，通过大量实验分析验证而得到的一
         个与传统纯化完全不同的精细的具有高活性、高产率、快速以及良好重复性的单
         克隆抗体的纯化方法，本试剂盒所用材料对人体没有损害，安全环保。
试剂特点：本试剂盒特点在于纯化操作的简单化、所得抗体的高活性和高纯度。实验表明，  
         本试剂盒可以得到95%左右纯度的抗体；并且由于配方考究，抗体在纯化过程中
         几乎没有损伤，完全保持应有的活性，实际应用极好。
适用范围：本试剂盒仅适用于小鼠igm类单克隆抗体腹水的纯化，不能用于其它ig类或亚
         类单克隆抗体腹水的纯化实验。
试剂组成：
试剂名称
数量
试剂名称
数量
纯化液a
65ml
30x浓缩透析液
150ml
纯化液b
   50ml
透析袋
1根
纯化液c
   30ml
说明书
1份
纯化液d
   40ml
空白不干胶标签
2片
纯化步骤：
   1、将单克隆抗体腹水从冰箱中取出，室温避光放置15分钟，然后用凉水边冲边摇匀快
  速解冻。
   2、将化开的单克隆抗体腹水12000rpm4-37℃离心10-20分钟。
3、先吸弃最上面浮沫和油脂，然后将上清转出到另一个干净容器或离心管；按每1毫升
  单克隆抗体腹水加入纯化液a1.3毫升，室温避光倒转20分。
4、8000rpm4-37℃离心10-20分钟，沉淀用纯化液b溶解到原单克隆抗体腹水1/2体积；
  再按每毫升加入纯化液c1.2毫升，室温避光倒转10分钟。
5、8000rpm4-37℃离心10-20分钟，弃沉淀收集上清；每1.1毫升上清液加纯化液d1.2
 毫升，室温避光倒转20分钟。
6、8000rpm4-37℃离心10-20分钟，收集沉淀用纯化液b收集溶解沉淀到原单克隆抗体
 腹水体积的1/2。
7、透析袋用pbst浸泡3-5分钟，然后用手揉捏数次，自来水冲净后接纯水冲洗干净，
 将纯化好的抗体放入用透析夹或绳扎紧。
8、透析液用纯水稀释30倍，将要透析的抗体袋子放入。抗体体积：透析液体积=1:50，
 4℃搅拌透析每次1小时，共3-4次。
9、8000rpm4-37℃离心10-20分钟，收集上清测蛋白浓度并调控在5mg/ml左右最后加
 10/万nan3防腐并除菌过滤4℃备用。
注意事项：
   1、溶血和腐败的腹水不得用于纯化（血性腹水离心后除去红细胞等可正常纯化）。
   2、离心温度最好不要超过37℃。
   3、操作和量取试剂要细致精准。
   4、不搅拌透析每次时间不得低于2小时。
技术咨询电话：                 售后服务及投诉qq:116977 6929

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刘
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