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大菱鲆为分批产卵鱼类，每一产卵季节可多次产卵。大菱鲆卵子成熟后，先进入生殖腔，即可采用人工授精方法进行挤卵受精。大菱鲆每尾雌鱼都有规则的排卵间隔，但个体的排卵周期有所不同：短的60（±4）小时，长的113（±2）小时，大多数在80～90小时之间。在12～14℃时，必需在排卵后10小时之内挤卵，才能保证卵子最大成活，这一时限受水温影响。人工授精时，先擦干鱼体和器皿，防止水及排泄物混入。然后按1×105粒卵加入1～5ml精液，快速搅拌均匀使精卵充分接触，再加入少量经沉淀沙滤的海水，使精液、卵子、水的体积比约为0.5︰100︰100，继续搅拌1分钟，然后静置5分钟，再加入海水，静置10～15分钟，待吸水膨胀后，清水冲洗1～2次，放入2000ml量筒中，加海水使上浮卵和沉淀卵分离。记录上浮卵数，上浮卵经消毒后放入孵化器中孵化。大菱鲆卵子的卵径是卵子活力的一个重要指标。当卵径在0.9～1.1mm时，受精率较高，而卵径为1.1～1.2mm受精率中等或较低，卵径0.9mm以下的受精率最差。优质的受精卵透明、浑圆，卵周隙小。受精后的第1.2次分裂，清晰对称。如需运输大菱鲆受精卵，装箱密度因运输距离长短而定，一般为3000～150000粒/l。运输过程中充氧袋内需保持低温状态。
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