猪蓝耳病毒抗体检测试剂盒（酶联免疫法）使用说明书
【产品名称】
通用名：猪蓝耳病毒抗体检测试剂盒（酶联免疫法）
英文名：diagnostic kit for antibodies to porcine reproductive and respiratory syndrome virus (elisa)
【包装规格】 96t×2/盒
【预期用途】猪蓝耳病是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus，prrsv）引起的一种以感染猪发热、厌食，妊娠母猪晚期流产、产死胎，各种年龄猪呼吸障碍为特征的高度传染性疾病。
本试剂盒用于检测猪血清、血浆中猪蓝耳病毒抗体，可用于猪蓝耳病毒疫苗免疫效果评价。
【原    理】
    本试剂盒系由预包被猪蓝耳病毒抗原的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成，应用酶联免疫法（elisa）原理检测猪血清、血浆样本中猪蓝耳病毒抗体。实验时在酶标板中加入阴阳性对照和待检样本，经温育后若样品中含有猪蓝耳病毒抗体，则将与酶标板上抗原结合，经洗涤除去未结合的其他成分后；再加入酶标记物，与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合；再经洗涤除去未结合的酶标记物，在孔中加tmb底物液，与酶反应形成蓝色产物，显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关；加入终止液终止反应后，产物变为黄色；用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值，即可知样品是否含有猪蓝耳病毒抗体。
【试剂盒组成】(试用装量减半) 
序号
名称
规格（96t×2）
1.
酶标板(12条×8孔，可拆分)
96t×2
2.
酶标记物
12ml×2
3.
样品稀释液
50ml×1
4.
20x浓缩洗涤液
50ml×1
5.
显色液
12ml×2
6.
终止液 
12ml×1
7.
阳性对照
1.5ml×1
8.
阴性对照
1.5ml×1
9.
说明书
1份
【储存及有效期】 于2～8℃避光保存，有效期为12个月。
包被板开封后请于2～8℃避光保存，避免受潮。使用期限为2个月。
【器材的准备】
1. 含450nm波长的酶标仪
2. 37℃恒温设备
3. 可调微量移液器
4. 移液器配套使用的枪头
5. 离心管
6. 蒸馏水或去离子水
【样品准备】
1.取动物全血按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血、无污染。样品1周内可于2～8℃保存，长期需置-20℃保存。
2.用样品稀释液将待检血清按40倍稀释（如5μl血清加入195μl样品稀释液中，混匀）。阴、阳性对照不用稀释。
3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解，然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。
【检验方法】
1.使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。
2.取所需用量酶标板条，设阴性/阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。
3.阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl；样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。
4.混匀，置37℃反应30分钟。
5.扣去孔内液体，每孔加250μl洗涤液，静置20秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。
6.每孔加酶标记物100μl。置37℃反应30分钟。
7.扣去孔内液体，每孔加250μl洗涤液，静置20秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。
8.每孔依次加显色液100μl，混匀，37℃避光反应30分钟。
9.每孔加终止液50μl，混匀，于450nm测定各孔吸光值（od值）。
【参考值】 实验正常的情况下，阴性对照≤0.20，阳性对照≥0.6，否则实验无效
【检验结果的解释】
1.样品od值≥0.5为阳性；样品od值＜0.5为阴性。
2.本实验结果为阴性时表明猪只抗体水平不足，建议补打相应疫苗。
【试验方法的局限性】
    该试验仅作为定性检测猪血清、血浆中猪蓝耳病毒抗体，根据od值高低可作抗体水平强、中、弱的粗略评估。
【注意事项】
1.实验操作时需戴手套、穿工作衣，严格健全和执行消毒隔离制度，各种实验废弃物都应按传染物处理。
2.终止液具有腐蚀性，应避免接触皮肤和衣物，如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。
3.酶标板从冷藏环境中取出时应恢复至室温方可开袋，未用完的酶标板需放入有干燥剂的密封袋中保存。
4.浓缩洗涤液在低温时容易结晶，使用时需恢复至室温以完全溶解。
5.洗涤时各孔均需加满液体，防止孔口有游离酶不能洗净。
6.用于检测的样品应保持新鲜。
7.试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。
8.不同批号试剂组分不得混用。
7.5.1亿森宝生物猪类疫病检测酶联免疫elisa试剂盒
货号 产品名称 规格
ysze001 猪蓝耳病elisa试剂盒 192次/盒
ysze002 猪瘟elisa试剂盒 192次/盒
ysze003 猪伪狂犬elisa试剂盒 192次/盒
ysze004 猪口蹄疫3abc抗体elisa试剂盒 192次/盒
ysze005 猪口蹄疫o型elisa试剂盒 192次/盒
ysze006 猪细小病毒elisa试剂盒 192次/盒
ysze007 猪圆环病毒ii型elisa试剂盒 192次/盒
ysze008 猪乙型脑炎elisa试剂盒 192次/盒
ysze009 猪弓形虫抗体elisa试剂盒 192次/盒
ysze010 猪流感elisa试剂盒 192次/盒
ysze011 猪附红细胞体病elisa试剂盒 96次/盒
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