临床意义 猪伪狂犬是由伪狂犬病毒(pseudorabies virus, prv)引起的家畜和多种野生动物发生一种急性传染病。该病以发热、奇痒、呼吸和神经系统疾病为主要特征。患病动物病死率高,但成年猪死亡率低,也不发生奇痒,妊娠母猪可导致流产、产死胎和木乃伊胎,新生仔猪和断奶仔猪死亡率较高。检测特异性猪伪狂犬病毒抗体,可作为猪场伪狂犬疫苗的免疫监测及该病的辅助诊断。本试剂盒采用伪狂犬病毒作为固相抗原,用于检测猪血清中抗伪狂犬病毒igg抗体。本试剂灵敏度高,特异性强,重复性好,操作方便快速,可分多次使用。 试剂组成 1.预包被板1套; 6. 样本稀释液(5号液)1支; 2.酶结合物(1号液)1支; 7. 终止液(6号液)1支; 3.洗涤液(2号液)1支; 8. 阳性对照品1支; 4.底物(3号液)1支; 9. 阴性对照品1支; 5.显色剂(4号液)1支;10.使用说明书1份; 操作程序 1. 样本稀释:用样本稀释液(5号液)将待检血清按1:100稀释,如取5ul血清与500ul样本稀释液,充分混匀；阴、阳对照不用稀释,直接加样。 2.加样反应:取出所需反应板条,样本检测孔每孔分别加已稀释样本血清100ul。同时设阴性、阳性及空白对照各1孔,取阴性、阳性对照各100ul分别加入反应孔内,空白对照孔仅加入100ul样本稀释液(5号液)。37℃避光反应30分钟后甩去孔内液体,每孔加洗涤液(2号液)1滴,立即用蒸馏水注满,静置30秒后甩去,再直接用蒸馏水洗涤四次,每次均静置30秒后甩去,最后一次甩去拍干。 3.加酶反应:除空白对照孔外其余每孔加酶结合物(1号液)2滴,37℃避光反应30分钟后甩去孔内液体,如上洗涤,拍干。 4. 显色反应:加底物(3号液)和显色剂(4号液)各1滴,混匀,37℃下避光显色10分钟。加终止液(6号液)1 滴,混匀,终止反应(加终止液后蓝色会变为黄色)。 结果判断 仪器判断:以空白对照调零用酶标仪于450nm(620nm作参比波长)读取o.d值,待检孔o.d值大于阴性对2.1倍者为阳性。当阴性对照o.d值低于0.07时按0.07计算。 注意事项 1.试剂盒在2-8℃下保存,每次取出时先平衡至室温后使用。滴瓶每次用后一定要将盖拧紧,各瓶盖之间切不可可混用。各试剂盒之间不可混用。 2.洗涤时将蒸馏水加满各孔,每次停放三十秒钟后甩去孔内液体。禁用自来水等其它水源。 3.为提高试验的可比性建议使用仪器判读结果并对阴性对照测复孔以减少误差。

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李海龙
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