- 品牌:robustnique
- 外观性状:
- 酶系活力:
- 温度适用范围:
- 产品标准:
- 保质期:18
概述:
hot start taq dna聚合酶是由普通taq dna聚合酶经过化学修饰得到,在室温时处于失活状态,需要经过高温(95°c)激活,可以有效减少pcr过程中的非特异性产物,具有更高的特异性和产率(1)。在使用时,pcr反应液应在95°c预加热8~10分钟进行激活,之后按照正常的pcr反应程序进行。被激活的酶和taq dna聚合酶功能一致,催化5’-3’dna合成,缺少3’-5’校正活性(2,3)。hotstart taq dna聚合酶适用于热启动pcr,所有操作过程可在室温完成,使用方便。
来源:
来源于一种重组的 e.coli 菌株,该菌株含有来源于thermusaquaticus yt-1的taq dna聚合酶基因。
应用:
热启动pcr,rt-pcr,长度达到3kb的基因组dna和cdna的特异性扩增,低拷贝模板的扩增,实时定量 pcr,多重pcr,具有3’-da末端产物的扩增(适用各种ta克隆系统)。
反应条件:
10× 反应缓冲液(含15mm mgcl2):670mm tris-hcl (ph 8.3 @ 25°c),160mm (nh4)2so4,15mm mgcl2,0.1%tween 20。
质量检测:
pcr功能测试:以人基因组dna为模板,扩增单拷贝antitrypsin基因,产物长度357bp,相比于taq dna聚合酶有效减少非特异性产物并具有更高的产物产量。
核酸内切酶活性:50μl反应体系中,20u该酶于1μg的hindiii消化的λdna于37°c温浴4小时,电泳条带无明显变化。
核酸外切酶活性:50μl反应体系中,20u该酶于1μg的puc19质粒于37°c温浴4小时,电泳条带无明显变化。
质保声明:
hot start taq dna聚合酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。
单位定义:
1单位指经高温激活后,在72°c反应30分钟,能够使10nmol 的dntp掺入酸不溶性沉淀所需要的酶量。
参考文献:
1. d‘aquila,r.t., etal.,maximizing sensitivity and specificity of pcr by preamplificationheating, nucleic acidsres., 19,3749, 1991.
2. moretti, t., etal.,enhancement of pcr amplification yield ans specificity usingamplitaqgold dna polymerase,biotechniques,25,716-722,1998.
3. weyant, r.s., etal., effectof ionic and nonionic detergents on the taqpolymerase, biotechniques,9, 309-308, 1990.
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