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1.1干细胞基础知识
干细胞的定义:干细胞(stem cells)是一类具有自我更新和分化潜能的原始细胞,是机体的起源细胞,是形成人体各项组织的原始细胞。自我更新是说它们可以分裂为更多相同类型的干细胞,分化潜能是指它们可以分化成熟为能执行特殊功能的特殊细胞类型,比如上皮细胞、肌细胞或血细胞。由于它在一定条件下,dc-cik委托培养,可以分成多种功能的细胞和组织,医学界称其为“全能细胞”“万用细胞” 。
茜素红:茜素磺酸钠,茜素s,茜素红s,茜素胭脂红,1,四川cik,2-二羟基蒽醌-3-磺酸钠,1,2-二羟基蒽醌-3-磺酸钠盐。橙黄色或黄棕色粉末。易溶于水,微溶于乙醇,不溶于苯。1%水溶液ph为2.15,其水溶液呈浅黄褐色,加盐酸后变成黄色,加氢氧化钠后则变成蓝紫色。有刺激性。能与许多金属离子生成带色化合物,能与锆、钍、铝、钛及铍和钙的显色反应。染色的原理就是茜素红和钙发生显色反应,产生一种深红色的带色化合物,这样成骨诱导的细胞外面沉积的钙结节也就被染成了深红色。
oil red o(油红o)染色的方法和原理:成脂肪诱导的过程中,细胞在胞浆中不断有油滴的累积,并不断的增加变大,cik培养,最后整个细胞的胞浆中都是油滴。oil red o染色的方法是对油滴的染色的一种方法。
步骤:
(1)吸去诱导液,再pbs 洗一到两次;
(2)加入10%中性甲醛,固定60min;
(3)吸去固定液,加入现配和过滤后的oil red o 染色液,染色60min;
(4)用pbs 洗2-5 次,去处残留的染色液和残渣;
(5)加入pbs,完成染色;
oil red o(油红o):-2 萘酚,苏丹红5b,cik委托培养,溶剂红27。红色粉末。是一种油溶性偶氮染料。易溶于苯,溶于乙醇(呈浅黄色红色)和丙酮。生物染色剂,淀粉凝胶电泳中作类脂和脂肪染色。显微技术中用作脂肪染色剂。作为脂肪细胞的染色剂的原理是使用oil red o 的油溶性,对其它的细胞结构着色性差。
带间充质干细胞(uc-mscs)
目前国内干细胞方面应用最为广泛的是间充质干细胞。这是一类起源于中胚层的细胞,在个体发育中存在于不同的组织和中,并保留有分化为外胚层来源的神经组织和内胚层来源的实质性组织的潜能,应用于临床的间充质干细胞主要是间充质干细胞和脐带间充质干细胞。相对于间充质干细胞,脐带间充质干细胞处于人体早期发育阶段,具有更强的增殖能力,受胎血屏障保护污染少,并具有较低的免疫原性和多样化的分泌因子能力,由于其易于培养,已成为中国临床应用最为广泛的干细胞类型。在骨及软骨损伤、神经系统退行性疾病、肝脏疾病、自体免疫类疾病、糖尿病、心脏疾病、肺损伤和防治移植带来的免疫排斥等方面得到了广泛应用。
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