——最适合天然产物的纯化,特别是嗜脂性分子纯化及制备
sephadex 葡聚糖凝胶通过表氯醇交联多个葡聚糖得到。葡聚糖与双官能团的表氯醇交联得到产品为g-10、g-25等。通过羟丙基化将sephadex g转化为可在有机溶剂中溶涨的葡聚糖凝胶得到产品sephardex lh-20。
层析原理:
凝胶过滤--------依赖于分子的大小和形状 吸附层析-----依赖于被分离化合物与凝胶之间的氢键数量和质量 分配层析----------------依赖于被分离化合物在流动相（溶剂）和固定相（凝胶）之间的分配，这主要由样品的极性和溶剂的极性决定的。 特点:
适合用有机溶剂分离嗜脂性分子，可以非常经济地大规模制备各种天然产物 结合凝胶过滤、分配色谱及吸附性层析于一身，分离结构非常相近的分子 载量可高达300mg样品/ml凝胶，极少需要再生，分离效果可保持十几年不变 sephadex lh-20性质
sephadex lh-20性质和操作
干胶溶胀表
排阻极限
4-5kd(球蛋白)
溶剂
溶胀体积(ml凝胶/g干胶粉末)
上样量
取决于所需分辩率
dimethyl sulphoxide 二甲亚砜
4.4-4.6
尺寸排阻模式
小于总体积的20%
pyridine 嘧啶
4.2-4.4
正相分配模式
小于总体积的1%
water 水
4.0-4.4
胶粒形状
球形,多孔
dimethylformamide
二甲基甲酰胺
3.8-4.2
颗粒大小(干)
18-111μm(直径)
saline 生理盐水
3.9-4.1
颗粒大小中间值(干)
70μm(直径)
methanol 甲醇
3.8-4.1
颗粒大小(甲醇)
27-163μm(直径)
methane dichloride 二氯乙烷
3.8-4.1
颗粒大小中间值(甲醇)
103μm(直径)
chloroform 氯仿
3.8-4.1
最大线性流速
720cm/h
proanol 丙醇
3.7-4.0
参考线性流速
60cm/h
ethanol 乙醇
3.6-3.9
ph的稳定性
isobutanol异丁醇
3.6-3.9
操作过程
2-11
formamide 甲酰胺
3.6-3.9
清洗过程
2-13
methylene dichloride 二氯甲烷
3.6-3.9
化学稳定性
在许多水溶液中稳定
butanol 丁醇
3.5-3.8
有机溶剂系统中稳定.
isopropanol异丙醇
3.3-3.6
高压灭菌
tetrahydrofuran
四氢呋喃
3.3-3.6
高压灭菌
121 ℃, 20min
dioxane 二氧杂环己烷
3.2-3.5
操作温度
4℃-40℃
acetone丙酮
2.4-2.6
保存条件
acetonitrile乙腈
2.2-2.4
新填料
4-25℃
carbon tetrachloride 四氯化碳
1.8-2.2
使用后填料
4-8℃, ph6-8, 勿冷冻,
benzene 苯
1.6-2.0
加入抑菌剂(如20%乙醇,0.04%叠氮钠)
ethyl acetate乙酸乙酯
1.6-1.8
toluene甲苯
1.5-1.6

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