v8蛋白酶
cat.no.：66676-43-5
ec：3.4.21.19
全名: 序列分析纯v8蛋白酶；金黄色葡萄球菌v8蛋白酶
别名: v8蛋白酶；谷氨酰胺内切酶；天冬酰胺内切酶
储存条件：冻干粉，2-8℃
来源：基因工程生产，大肠杆菌表达。
 
1.产品简介
v8蛋白酶属于丝氨酸蛋白酶家族，能特异水解谷氨酸或天冬氨酸残基羧基侧肽键。在ph 7.8的nh4hco3和ph 4.0的ch3coonh4缓冲液中识别并切割glu羧基端肽键，在ph 7.8的磷酸盐缓冲液中识别并切割glu或asp羧基端肽键，且对glu的水解速率高于asp。v8蛋白酶在ph4.0-10.0之间均有活性，最适ph为8.0-8.5。在进行蛋白质酶切测序、肽图谱分析和肽质量指纹图谱分析中使用时，可以单独使用或与其他蛋白酶混合使用。v8蛋白酶的抑制剂有二异丙基氟磷酸（dfp）、α2- 巨球蛋白和nα-p-甲苯磺酰基-l-赖氨酸氯甲基酮（tlck）。
 
2.产品特性
来源
重组大肠杆菌
产品外观
白色、类白色、类黄色粉末
比活
≥ 5.0 au /mg pro.
蛋白电泳
单一主条带
分子量
24.0±2.4 kda
单位定义：在25℃，ph7.8的条件下，每分钟催化底物（z-phe-leu-glu-4-nitranilide）生成1μmol对硝基苯胺（4-nitroaniline）所需要的酶量为一个酶活性单位。
 
3.储存和运输稳定性
储存稳定性：重组v8蛋白酶冻干粉存于2-8℃，24个月稳定；
溶解后稳定性：用水或50mm tris-hcl ph8.0溶解以后存于-20℃ 以下（1mg/ml），6个月稳定；用水或50mm tris-hcl ph8.0溶解以后存于4℃（1mg/ml，无菌），2个月稳定；用50mm tris-hcl ph8.0溶解以后存于25℃或37℃（0.5mg/ml）12h，活性可维持85%以上；溶解后溶液可反复冻融10次无活性损失。
运输稳定性：蓝冰保温运输，活性稳定。
 
4.推荐使用方法
1）使用前注意
可按使用量分装以*限度避免污染或自切。
2）目的蛋白溶解
用酶切buffer溶解目的蛋白，例如25-50mm nh4hco3 ph7.8，若溶解度不好对目的蛋白变性，添加尿素、sds、dtt或加热。尿素和sds对v8蛋白酶的影响见表一。
3）酶切
v8蛋白酶和目的蛋白推荐比例为1/20-1/100（w/w)，25℃或37℃酶切2-18h。
 
表一：v8蛋白酶在含有不同浓度变性剂，尿素25℃2h，sds25℃12h的稳定性
（注：v8蛋白酶0.5mg/ml，50mm tris-hcl ph8.0）
变性剂
浓度
残余酶活
不添加
0
100%
尿素
2m
95%
5m
12%
8m
0
sds
0.1%
90%
0.5%
80%
1%
50%
 
      5.产品优势
序列分析纯蛋白酶：特异性高，稳定性好。
无动物源性：重组生产，无外源性的病毒污染，生产过程不使用任何动物源原料。
质量稳定：批量生产，可保证稳定连续的批次生产；产 品批次间无差异，质量稳定。
纯度高：比活高；宿主蛋白残留小于生物制品限度要求。
冻干粉：易于储存和运输。
符合法规要求：生产设备和生产环境符合相关法规要求，生产过程完全遵循nsf iso 9001:2008质量体系并符合gmp指导原则。
质量文件完整：按客户需求，可提供相关法规支持文件。
 
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