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EMSA凝胶迁移技术服务

2018/6/1 12:31:28发布80次查看
  • 品牌:釜诚
  • 型号:jeol
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emsa凝胶迁移技术服务
emsa凝胶迁移技术服务原理:emsa凝胶迁移技术服务是一种研究dna结合蛋白和其相关的dna结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究dna结合蛋白,目前已用于研究rna结合蛋白和特定的rna序列的相互作用。通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32p同位素标记的dna或rna探针一同保温,在非变性的聚丙烯凝胶电泳上,分离复合物和非结合的探针。dna-复合物或rna-复合物比非结合的探针移动得慢。同位素标记的探针依研究的结合蛋白的不同,可是双链或者是单链。当检测如转录调控因子一类的dna结合蛋白,可用纯化蛋白,部分纯化蛋白,或核细胞抽提液。在检测rna结合蛋白时,依据目的rna结合蛋白的位置,可用纯化或部分纯化的蛋白,也可用核或胞质细胞抽提液。竞争实验中采用含蛋白结合序列的dna或rna片段和寡核苷酸片段(特异),和其它非相关的片段(非特异),来确定dna或rna结合蛋白的特异性。在竞争的特异和非特异片段的存在下,依据复合物的特点和强度来确定特异结合。
emsa凝胶迁移技术服务实验步骤:
1. 探针的标记;
2. 探针的纯化;
3. emsa胶的配制;
4. emsa结合反应;
5. 电泳分析。
emsa凝胶迁移技术服务客户需知: 方法:同位素32p标记探针/生物素/荧光素标记/进行检测。 技术要点:实验过程包括核蛋白的提取,同位素标记/生物素/荧光素标记/与纯化,凝胶电泳,胶片暴光等。在emsa操作中会用到同位素,要注意实验室环境和实验员的保护。
emsa凝胶迁移技术服务客户提供: 细胞 25ml的细胞瓶培养的细胞。 组织 200mg-400mg 探针 自备探针。

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